生物素親和素ELISA系統(tǒng)的檢測原理是什么？

    生物素親和素(又稱抗生物素)系統(tǒng)(biotin avidin system,BAS)標(biāo)記抗體的技術(shù)是20世紀70年代后期發(fā)展起來的一種新的免疫檢測方法。那么你知道生物素親和素ELISA系統(tǒng)的檢測原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！

生物素或親和素與抗體分子或標(biāo)記物結(jié)合后，既不影響前者的親和力，也不改變后者的特性。親和素分子的4個活性部位并非都和連接在抗體分子上的生物素殘基結(jié)合，剩下的游離部位尚可作為另一種生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)的受體。這些特點就是BAS免疫標(biāo)記技術(shù)的基礎(chǔ)和原理。

    BAS基本檢測方法可分為兩大類，一類以游離親和素居中，分別連接生物素化大分子反應(yīng)體系和標(biāo)記生物素，稱為BAB法或橋聯(lián)親和素生物素法(bridged avidin biotintechnique,BRAB)，其改良法稱為(avidin biotin complex,ABC)法。另一類以標(biāo)記親和素連接生物素化大分子反應(yīng)體系，稱為BA法或標(biāo)記親和素和生物素法(LAB)。現(xiàn)分別介紹如下：

1. BA法亦稱LBA法。系將特異性抗體生物素化，將酶分子標(biāo)記在親和素分子上，生物素化抗體與被檢抗原結(jié)合后，再借BAS的高度親和力將酶分子聯(lián)結(jié)到抗原分子上，經(jīng)酶促反應(yīng)即可檢出抗原。

2. BAB法亦稱BRAB法。系將特異性抗體生物素化，將酶分子標(biāo)在生物素上，然后以游離親和素橋聯(lián)物，使被檢抗原、生物素化抗體和酶標(biāo)生物素聯(lián)成一體。

3. ABC法原理與BAB法基本相同，只是親和素和酶標(biāo)生物素需要先按一定比例形成ABC復(fù)合物，這種網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)結(jié)合了大量的酶分子，當(dāng)親和素尚未被酶標(biāo)生物素飽和時，生物素化抗體即可與之結(jié)合。

    以上便是BAS ELISA的三種基本檢測法。上述方法中，如將第二抗體生物素化，即為間接法。由于間接法增加了一級抗原抗體反應(yīng)，因而比直接法更敏感，應(yīng)用范圍更廣。更多有關(guān)生物素親和素ELISA系統(tǒng)的檢測原理是什么，請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司。